Δοκιμή SARS-COV-2

Από τον Δεκέμβριο του 2019, ο COVID-19 που προκαλείται από σοβαρό οξύ αναπνευστικό σύνδρομο (SARS) έχει εξαπλωθεί σε όλο τον κόσμο.Ο ιός που προκαλεί το COVID-19 είναι ο SARS-COV-2, ένας μονόκλωνος συν ιός RNA που ανήκει στην οικογένεια των κοροναϊών.Οι β κοροναϊοί έχουν σχήμα σφαιρικό ή οβάλ, διαμέτρου 60-120 nm και συχνά πλειομορφικοί.Επειδή ο φάκελος ενός ιού έχει ένα κυρτό σχήμα που μπορεί να εκτείνεται σε όλες τις πλευρές και μοιάζει με στεφάνη, ονομάζεται κορωνοϊός.Έχει μια κάψουλα και S (πρωτεΐνη Spike), M (πρωτεΐνη μεμβράνης), M (πρωτεΐνη μήτρας) και E (πρωτεΐνη φακέλου) κατανέμονται στην κάψουλα.Το περίβλημα περιέχει RNA που συνδέεται με Ν (πρωτεΐνη νουκλεοκαψιδίου).Η πρωτεΐνη S τουSARS-COV-2περιέχει υπομονάδες S1 και S2.Η περιοχή δέσμευσης υποδοχέα (RBD) της υπομονάδας S1 επάγει μόλυνση SARS-COV-2 δεσμεύοντας το ένζυμο μετατροπής της αγγειοτενσίνης 2 (ACE2) στην κυτταρική επιφάνεια.

Το Sars-cov-2 μπορεί να μεταδοθεί από άτομο σε άτομο και είναι πιο μεταδοτικό από το sarS-COV, το οποίο εμφανίστηκε το 2003. Μεταδίδεται κυρίως με αναπνευστικά σταγονίδια και στενή ανθρώπινη επαφή και μπορεί να μεταδοθεί με αεροζόλ εάν υπάρχει σε περιβάλλον με καλό αεροστεγές για μεγάλο χρονικό διάστημα.Οι άνθρωποι είναι γενικά ευαίσθητοι στη μόλυνση και η περίοδος επώασης είναι 1 έως 14 ημέρες, κυρίως 3 έως 3 ημέρες.Μετά τη μόλυνση με νέο κορωνοϊό, ήπιες περιπτώσεις COVID-19 θα εμφανίσουν συμπτώματα κυρίως πυρετού και ξηρού βήχα.Το COVID-19 είναι εξαιρετικά μολυσματικό και εξαιρετικά μεταδοτικό σε ασυμπτωματικά στάδια μόλυνσης.Η μόλυνση από τον ιό Sars-cov-2 μπορεί να προκαλέσει πυρετό, ξηρό βήχα, κόπωση και άλλα συμπτώματα.Οι σοβαροί ασθενείς συνήθως αναπτύσσουν δύσπνοια και/ή υποξαιμία 1 εβδομάδα μετά την έναρξη και οι σοβαροί ασθενείς μπορεί να οδηγήσουν σε σύνδρομο οξείας αναπνευστικής δυσχέρειας, πηκτικότητα και ανεπάρκεια πολλαπλών οργάνων.

Επειδή το sarS-COV-2 είναι εξαιρετικά μεταδοτικό και θανατηφόρο, οι γρήγορες, ακριβείς και βολικές διαγνωστικές μέθοδοι για την ανίχνευση του SARS-COV-2 και την απομόνωση των μολυσμένων ατόμων (συμπεριλαμβανομένων των ασυμπτωματικών μολυσμένων ατόμων) είναι το κλειδί για την ανακάλυψη της πηγής μόλυνσης, εμποδίζοντας την αλυσίδα μετάδοσης της νόσου και πρόληψη και έλεγχος της επιδημίας.

POCT, επίσης γνωστή ως τεχνολογία ανίχνευσης δίπλα στο κρεβάτι ή τεχνολογία ανίχνευσης σε πραγματικό χρόνο, είναι ένα είδος μεθόδου ανίχνευσης που εκτελείται στο χώρο δειγματοληψίας και μπορεί να λάβει γρήγορα αποτελέσματα ανίχνευσης χρησιμοποιώντας φορητά αναλυτικά όργανα.Όσον αφορά την ανίχνευση παθογόνων, το POCT έχει τα πλεονεκτήματα της γρήγορης ταχύτητας ανίχνευσης και χωρίς περιορισμό τοποθεσίας σε σύγκριση με τις παραδοσιακές μεθόδους ανίχνευσης.Το POCT όχι μόνο μπορεί να επιταχύνει την ανίχνευση του COVID-19, αλλά και να αποφύγει την επαφή μεταξύ του προσωπικού ανίχνευσης και των ασθενών και να μειώσει τον κίνδυνο μόλυνσης.Επί του παρόντος,Τεστ COVID-19οι τοποθεσίες στην Κίνα είναι κυρίως νοσοκομεία και ιδρύματα δοκιμών τρίτων και το προσωπικό δοκιμών πρέπει να λαμβάνει δείγματα απευθείας μπροστά σε άτομα που θα εξεταστούν.Παρά τα προστατευτικά μέτρα, η δειγματοληψία απευθείας από έναν ασθενή αυξάνει τον κίνδυνο μόλυνσης για το άτομο που το εξετάζει.Ως εκ τούτου, η εταιρεία μας ανέπτυξε ειδικά ένα κιτ για δειγματοληψία ατόμων στο σπίτι, το οποίο έχει τα πλεονεκτήματα της γρήγορης ανίχνευσης, της απλής λειτουργίας και της ανίχνευσης σε σπίτι, σταθμό και άλλα μέρη χωρίς συνθήκες προστασίας βιοασφάλειας.

Η κύρια τεχνολογία που χρησιμοποιείται είναι η τεχνολογία ανοσοχρωματογραφίας, γνωστή και ως προσδιορισμός πλευρικής ροής (LFA), η οποία είναι μια μέθοδος ταχείας ανίχνευσης που καθοδηγείται από τριχοειδική δράση.Ως μια σχετικά ώριμη τεχνολογία ταχείας ανίχνευσης, έχει απλή λειτουργία, σύντομο χρόνο αντίδρασης και σταθερά αποτελέσματα.Το αντιπροσωπευτικό είναι το χαρτί ανοσοχρωματογραφίας κολλοειδούς χρυσού (GLFA), το οποίο γενικά περιλαμβάνει επίθεμα δείγματος, επίθεμα δεσμών, φιλμ νιτροκυτταρίνης (NC) και επίθεμα απορρόφησης νερού, κ.λπ. Το φιλμ στερεώνεται με αντίσωμα σύλληψης.Αφού το δείγμα προστεθεί στο επίθεμα δείγματος, ρέει διαδοχικά μέσω του συνδετικού μαξιλαριού και του φιλμ NC υπό τη δράση του τριχοειδούς και τελικά φτάνει στο απορροφητικό επίθεμα.Όταν το δείγμα ρέει μέσα από το συνδετικό επίθεμα, η ουσία που θα μετρηθεί στο δείγμα θα δεσμευτεί με το αντίσωμα ετικέτας χρυσού.Όταν το δείγμα διέρρευσε μέσω της μεμβράνης NC, το δείγμα που θα δοκιμαστεί συλλήφθηκε και σταθεροποιήθηκε από το δεσμευμένο αντίσωμα και εμφανίστηκαν κόκκινες λωρίδες στη μεμβράνη NC λόγω της συσσώρευσης νανοσωματιδίων χρυσού.Η ταχεία ποιοτική ανίχνευση του SARS-COV-2 θα μπορούσε να επιτευχθεί παρατηρώντας τις κόκκινες ζώνες στην περιοχή ανίχνευσης.Το κιτ αυτής της μεθόδου είναι εύκολο να διατεθεί στο εμπόριο και να τυποποιηθεί, εύκολο στη χρήση και γρήγορη απόκριση.Είναι κατάλληλο για τον έλεγχο πληθυσμού μεγάλης κλίμακας και χρησιμοποιείται ευρέως στην ανίχνευση του νέου κοροναϊού.

Νέες λοιμώξεις από κορωνοϊόαποτελούν μια σοβαρή πρόκληση που αντιμετωπίζει ο κόσμος.Η γρήγορη διάγνωση και η έγκαιρη θεραπεία είναι το κλειδί για να κερδίσετε τη μάχη.Ενόψει της υψηλής μολυσματικότητας και του μεγάλου αριθμού μολυσμένων ατόμων, είναι πολύ σημαντικό να αναπτυχθούν κιτ ακριβούς και γρήγορης ανίχνευσης.Είναι γνωστό ότι μεταξύ των δειγμάτων που χρησιμοποιούνται συνήθως, το υγρό κυψελιδικής πλύσης έχει το υψηλότερο θετικό ποσοστό μεταξύ των φαρυγγικών επιχρισμάτων, του σάλιου, των πτυέλων και του υγρού κυψελιδικής πλύσης.Επί του παρόντος, η πιο κοινή εξέταση είναι η λήψη δειγμάτων από ύποπτους ασθενείς με επιχρίσματα λαιμού από τον άνω φάρυγγα, όχι από την κατώτερη αναπνευστική οδό, όπου ο ιός μπορεί εύκολα να εισέλθει.Ο ιός μπορεί επίσης να ανιχνευθεί στο αίμα, τα ούρα και τα κόπρανα, αλλά δεν είναι η κύρια εστία μόλυνσης, επομένως η ποσότητα του ιού είναι χαμηλή και δεν μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως βάση για ανίχνευση.Επιπλέον, καθώς το RNA είναι πολύ ασταθές και εύκολα αποικοδομείται, η λογική επεξεργασία και η εξαγωγή των δειγμάτων μετά τη συλλογή είναι επίσης παράγοντες.

［1］ Chan JF, Kok KH, Zhu Z, κ.ά.Γονιδιωματικός χαρακτηρισμός του νέου ανθρωποπαθογόνου κορωνοϊού του 2019 που απομονώθηκε από ασθενή με άτυπη πνευμονία μετά από επίσκεψη στο Wuhan［J］．Emerg Microbes Infect, 2020, 9(1) : 221-236.

［2］ Hu B., Guo H., Zhou P., Shi ZL，Nat.Rev. Microbiol., 2021, 19, 141-154

(3) Lu R., Zhao X., Li J., Niu P., Yang B., Wu H., Wang W., Song H., Huang B., Zhu N., Bi Y., Ma X. Zhan F., Wang L., Hu T., Zhou H., Hu Z., Zhou W., Zhao L., Chen J., Meng Y., Wang J., Lin Y., Yuan J., Xie Z., Ma J., Liu WJ, Wang D., Xu W., Holmes EC, Gao GF, Wu G., Chen W., Shi W., Tan W., Lancet, 2020, 395-546